miRNA(microRNA) 是一類長度約19-24nt的非編碼單鏈RNA,通過堿基互補配對的方式與靶基因的3'UTR區部分或完全互補,剪切靶基因的轉錄產物或者抑制轉錄產物的翻譯,從而起到轉錄后調控靶基因表達的作用。

miRNA廣泛存在于動物、植物、真菌及病毒的基因組中,調控生物體生長發育和疾病發生等過程中相關基因的表達。miRNA的異常表達可能會導致生理狀態的異常和疾病的產生,在多種癌癥中,其表達水平會發生明顯改變,有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外,在許多其他的病變組織和細胞中也檢測到了miRNA的異常表達。因此對miRNA的表達的研究具有重要意義。

miRNA長度很短,無法用Oligo (dT)18或6N進行逆轉錄,泓迅科技可提供莖環法逆轉錄引物、相應的擴增引物和/或特異性TaqMan探針設計與合成方案,即可對其進行熒光定量。除常用的染料法和TaqMan探針外,還可選擇設計合成TaqMan-MGB探針,其探針設計得更短,特異性更高。

miRNA探針 miRNA表達

案例展示

泓迅科技根據莖環法miRNA表達檢測設計與合成方案,分別制備了兩種靶標熒光探針:miRNA靶標A熒光探針FAM-oligo-BHQ1、miRNA靶標B熒光探針HEX-oligo-BHQ1,對長度很短、無法用Oligo (dT)18或6N逆轉錄的miRNA分子進行了ddPCR檢測,結果如下:

FAM-oligo-BHQ1探針檢測靶標信號:

FAM-oligo-BHQ1探針檢測靶標信號

HEX-oligo-BHQ1探針檢測靶標信號:

HEX-oligo-BHQ1探針檢測靶標信號

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