原核蛋白定制表達服務

原核蛋白表達系統一般以大腸桿菌為宿主細胞。由于細胞增殖快、表達量高、純化方便、穩定性好、抗污染能力強和成本低等優勢,原核蛋白表達系統最為成熟可靠,同時也是目前蛋白表達實驗中最常用、最經濟實惠的表達系統。

然而,原核蛋白表達系統也存在一些困難。比如,要表達的基因編碼區密碼子使用偏好或載體上調控元件與宿主菌不相容,導致目的蛋白無法表達或者表達量低,甚至雖然表達成功但是目的蛋白不可溶等。

佛罗伦萨散热器借助于業內領先的密碼子優化軟件NG™Codon以及我們擁有的十年以上蛋白質優化與表達純化的經驗,在原核表達的每一個環節都為您提供專業的技術保障,不僅確保您的目標蛋白的表達量,還可以根據您的需求確保高純度的交付產品,讓您專注于后續的實驗!

原核蛋白定制表達服務特色

  1. NG™Codon序列優化軟件:保證以原核宿主細胞偏好的DNA序列組合來構建載體;
  2. Syno?Assembly拼裝平臺:優化的DNA組裝方法可以根據需求進行任何功能元件的拼裝組合;
  3. Syno?Express系列載體:多種促溶促表達標簽的優化組合,確保成功表達,保證高效表達!

原核蛋白定制表達服務內容

  1. 表達載體構建(可選)
  2. 包括密碼子優化、基因合成和亞克隆。
    基因序列通過泓迅科技業內領先的軟件NG™Codon進行密碼子優化后,蛋白表達量可提高幾倍至數十倍。泓迅卓越的合成生物學Syno?平臺合成的基因裝入表達最佳的載體中,通過測序驗證插入重組質粒 100%序列正確。泓迅可以為客戶提供多種常見的商業化載體,如pET、pCOLD等。此外,泓迅還利用強大的合成生物學元件構建功能,優化并改造了包括sumo、MBP、GST、Trx等促溶促表達標簽的pSYNO 系列原核表達載體供您選擇,詳詢[email protected]。
    交付周期:10-20個工作日(取決于基因長度及復雜度)
    交付內容:1管約2~5 μg干粉質粒DNA;1管甘油菌;測序驗證報告1份,含.ab1格式測序峰圖

  3. 表達條件的優化
  4. 保證序列正確的前提下,宿主菌對于表達效果的影響也非常明顯。
    泓迅科技將重組質粒轉化到多種表達宿主菌中,包括BL21(DE3)、 ArcticExpress(DE3)、Rosetta(DE3)pLySs、Rosetta-gami B(DE3) 等各有特色的菌株。轉化后我們至少挑取6個陽性克隆質粒進行表達小試和優化。小試的過程中我們會優化測試適合于各種菌株的培養條件,包括溫度、培養基、誘導劑種類、誘導時機和誘導量等因素。通過SDS-PAGE檢測表達量和可溶性,提供是否放大以及放大規模的可行性建議。
    交付周期:5個工作日
    交付內容:小試驗證報告1份,含SDS-PAGE膠原圖

  5. 蛋白放大表達和純化
  6. 優化到合適表達條件基因,使用1L或更大的培養規模誘導表達重組菌。培養并誘導后,進行一步親和純化或離子交換,疏水及凝膠多步純化(可選或多?。?。默認SDS-PAGE檢測純度,Western blot檢測正確性(可選,客戶提供驗證過的一抗)。
    交付周期:10-15個工作日
    交付內容:1-10mg重組蛋白以及純化報告數據

  7. 蛋白后期加工(可選)
  8. 對于有進一步特殊要求的蛋白,泓迅為您提供多種后期加工選擇,包括純化后蛋白的標簽切除、過濾除菌、內毒素去除、凍干、N端測序等服務。對于您的特殊需求,我們經驗豐富的工程師可以為您提供量身定制的后期服務。
    交付周期:10個工作日
    交付內容:請聯系[email protected]確認

原核蛋白定制表達訂購與咨詢

您可以通過以下任意方式下單或咨詢,工作時間我們保證在1小時內給您反?。?/p>

  1. Email:下載我們的《泓迅科技蛋白表達純化訂購表》,填寫完整后發送到[email protected]
  2. 電話訂購:您可以直接撥打免費熱線4000-973-630轉803聯系我們經驗豐富的工程師
  3. QQ咨詢:任何技術問題均可與我們在線互動,泓迅科技官方企業QQ:4000-973-630

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泓迅科技蛋白表達純化訂購表